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【保存條件】 -20℃避光保存，有效期1年。 【概述】 Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33342染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。 Hoechst 33342的最大激發(fā)波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長為 350nm，最大發(fā)射波長為461nm。 本Hoechst 33342染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。 【使用方法】 該產(chǎn)品使用時應室溫解凍并充分搖勻。 1. 對于固定的細胞或組織： a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33342染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33342染色。 b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。 c. 吸除Hoechst 33342染色液，用PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。 d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。 2. 對于活細胞或培養(yǎng)的組織： a. 加入適當量Hoechst 33342染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于6孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。 b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。細胞發(fā)生凋亡時，在熒光顯微鏡下觀察會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。 【注意事項】 1. 本品為進口原料配制，成像與穩(wěn)定效果更佳。 2. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。 3. 為減緩熒光淬滅可以使用ES-8312抗熒光淬滅封片劑。 4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 【參考文獻】 1. Targeting a therapeutic LIF transgene to muscle via the immune system ameliorates muscular dystrophy. Steven S Welc et al. Nature communications, 10(1), 2788-2788 (2019) 2. The transforming activity of Wnt effectors correlates with their ability to induce the accumulation of mammary progenitor cells. Liu BY, et al. Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 101, 4158-4163 (2004)

【保存條件】-20℃避光保存，有效期1年?！靖攀觥縃oechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的最大激發(fā)波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長為352nm，最大發(fā)射波長為461nm。本品Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色?！臼褂梅椒ā吭摦a(chǎn)品使用時應室溫解凍并充分搖勻。1. 對于固定的細胞或組織：a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。c. 吸除Hoechst 33258染色液，用PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。2. 對于活細胞或培養(yǎng)的組織：a. 加入適當量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于6孔板一個孔需加入1ml 染色液，對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。細胞發(fā)生凋亡時，在熒光顯微鏡下觀察會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染?！咀⒁馐马棥?. 本品為進口原料配制，成像與穩(wěn)定效果更佳。2. Hoechst 33258對人體有害，請注意適當防護。3. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。4. 為減緩熒光淬滅可以使用ES-8312抗熒光淬滅封片劑。5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【保存條件】-20℃避光保存，有效期1年?！靖攀觥縃oechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。Hoechst 33258的最大激發(fā)波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長為352nm，最大發(fā)射波長為461nm。本品Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色?！臼褂梅椒ā吭摦a(chǎn)品使用時應室溫解凍并充分搖勻。1. 對于固定的細胞或組織：a. 對于細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則先進行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。b. 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。c. 吸除Hoechst 33258染色液，用PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。2. 對于活細胞或培養(yǎng)的組織：a. 加入適當量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對于6孔板一個孔需加入1ml 染色液，對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。b. 在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。細胞發(fā)生凋亡時，在熒光顯微鏡下觀察會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。【注意事項】1. 本品為進口原料配制，成像與穩(wěn)定效果更佳。2. Hoechst 33258對人體有害，請注意適當防護。3. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。4. 為減緩熒光淬滅可以使用ES-8312抗熒光淬滅封片劑。5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【保存條件】 -20℃保存,有效期2年 【概述】 0.25%胰酶細胞消化液(含EDTA)含0.25%胰酶、EDTA和酚紅，pH值為7.2-7.8。該消化液經(jīng)過過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化，或者一些組織的消化。 【使用建議（僅供參考）】 1. 貼壁細胞的消化：a.吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。b.加入少量0.25%胰酶細胞消化液(含EDTA)，略蓋過細胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。c.顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。2. 組織的消化：a.不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。 【注意事項】 1. 胰酶消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。 2. 注意無菌操作，盡量避免污染。 3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【保存條件】-20℃保存穩(wěn)定6-12個月，長期保存請置于-80℃?！靖攀觥縃eLa細胞是世界上第一株體外連續(xù)培養(yǎng)的人類非整倍體永生化細胞株，也是合適的轉(zhuǎn)染宿主，目前已被廣泛用于腫瘤等疾病研究和生物制品制造。該細胞是GeyGO等人于1951年從一名罹患宮頸癌的31歲黑人婦女中分離出來的上皮細胞。據(jù)報道，該細胞免疫過氧化物酶染色顯示細胞角蛋白陽性，p53的表達水平較低，且pRB（視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制因子）水平正常。 該產(chǎn)品為Hela細胞收集沉淀，每4管由100mm 皿消化解離收集（每皿融合度約90-100%，約107細胞）?！净蚪M提取效果圖】 圖1. 293T細胞基因組瓊脂糖凝膠電泳圖（泳道從左往右分別為DNA Marker DL2000，Hela細胞基因組DNA)【注意事項】1. 使用時應盡量避免其他核酸或相關(guān)污染，細胞越新鮮收集其核酸越穩(wěn)定。2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【保存條件】 -20℃保存穩(wěn)定6-12個月，長期保存請置于-80℃。 【概述】 人胚腎細胞株 293 插入 SV40 T-抗原基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱為293T。該細胞最初的名字是 293tsA1609neo，攜帶 SV40復制序列，被廣泛用于逆轉(zhuǎn)錄病毒生產(chǎn)、基因表達和蛋白表達。 該產(chǎn)品為293T細胞收集沉淀，每4管由100mm 皿消化解離收集（每皿融合度約90-100%，約107細胞）。 【基因組提取效果圖】 圖1. 293T細胞基因組瓊脂糖凝膠電泳圖（泳道從左往右分別為293T細胞基因組DNA，DNA Marker DL2000) 【注意事項】 1. 使用時應盡量避免其他核酸或相關(guān)污染，細胞越新鮮收集其核酸越穩(wěn)定。2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【保存條件】 4℃保存，有效期1年。 【概述】 本溶液由0.2M NaHCO3、0.05N NaOH、200mM HEPES組成，經(jīng)過濾除菌，可用于細胞等相關(guān)實驗。 【注意事項】 1. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 2. 該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不得用于臨床診斷或其他用途。

【保存條件】 室溫（15–25°C）保存12個月, 2–8°C或–20°C保存24個月 【概述】 TripleSelect與胰蛋白酶一樣，可裂解賴氨酸和精氨酸C-末端上的肽鍵。但是，TripleSelect無與倫比的純度提高了特異性，其原因在于只有一種酶發(fā)揮作用。這減少了胰蛋白酶和其他提取物中存在的多種酶的裂解作用造成的損害。 【產(chǎn)品特點】 l 對細胞作用溫和：純度提高了特異性，其原因在于只有一種酶發(fā)揮作用。這減少了胰蛋白酶和其他提取物中由于多種酶切割造成的損害。l 在室溫下保持穩(wěn)定：在室溫或4°C下可保持穩(wěn)定12-24個月，因此易于儲存和處理、方便快捷。 l 無動物來源蛋白：與常用豬胰蛋白酶不同，本試劑不含動物來源成分。 l 無需終止，易于使用：無需使用胰蛋白酶抑制劑（如 FBS）終止消化，PBS或DMEM等稀釋后自動失活。 【使用建議】 1. 使用前將TripleSelect 和完整的生長培養(yǎng)基恢復至室溫。2. 將待消化細胞培養(yǎng)器皿中培養(yǎng)去除。 3. 使用DPBS（無鈣鎂）清洗細胞，清洗完去除DPBS液體。 4. 加入相應體積的TripleSelect消化液（如25cm2瓶中加入1-2ml TripleSelect消化液，75cm2瓶中加入5ml TripleSelect消化液） 5. 37°C孵育至細胞變圓脫落（鏡下觀察），可輕拍培養(yǎng)瓶/皿。 6. 加入5ml 完全培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶/皿（體積根據(jù)不同面積培養(yǎng)瓶/皿），可輕輕吹打使細胞更好分離。 7. 將含細胞的液體移入15ml無菌離心管中。以200-500g轉(zhuǎn)速離心5-10分鐘使細胞沉淀。 8. 去除上清后，加入含血清的完全培養(yǎng)液使細胞沉淀重新懸浮，即可用于后續(xù)實驗【注意事項】 1. 注意無菌操作，盡量避免污染。 2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【保存條件】-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光保存，有效期1個月【概述】細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色 (Propidium staining，即PI staining)方法進行細胞周期與細胞凋亡分析的檢測試劑盒。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB）的類似物，能夠嵌入堿基對之間實現(xiàn)與雙鏈DNA結(jié)合。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強度和雙鏈 DNA的含量成正比。細胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定，然后根據(jù)DNA含量的分布 情況，可以進行細胞周期和細胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假設G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。凋亡細胞由于細胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導致部分基因組DNA片段在染色過程中丟失，因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染，即熒光強度小于1，在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰，即凋亡細胞峰。 ?細胞發(fā)生凋亡時，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細胞凋亡的早期，細胞對前向角光散射的能力顯著降低，對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察細胞凋亡情況。 ?本試劑盒通常應用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測。如果用于組織的細胞周期與細胞凋亡檢測，則必須把組織消化成單細胞狀態(tài)，才可以進行檢測，每個樣品的細胞數(shù)量可以為10-100萬?！臼褂梅椒ǎ▋H供參考）】1. 細胞樣品的準備：a. 對于貼壁細胞：小心收集細胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用胰酶消化細胞，至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時， 加入前面收集的細胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。 b. 對于懸浮細胞：1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊 離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。2. 細胞固定：加入1毫升冰浴預冷70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4oC固定30分鐘或更長時間。通常固定2小時或以上更能保證染色效果，固定12-24小時可能效果更佳。1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的70%乙醇，以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預冷的 PBS，重懸細胞。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。3. 碘化丙啶染色混合液的配制：參考下表，根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量配制適量的碘化丙啶染色液： 1個樣品6個樣品12個樣品染色緩沖液0.5ml3ml6mlPI染色液（20×）25μl150μl300μlRNase溶液（50×）10μl60μl120μl總體積0.535ml3.21ml6.42ml4. 染色：每管細胞樣品中加入0.5毫升碘化丙啶染色混合液，緩慢并充分重懸細胞沉淀，37oC避光溫浴30分鐘。隨后可以4oC或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小時內(nèi)完成流式檢測，最好能在當日完成流式檢測。5. 流式檢測和分析：用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光，同時檢測光散射情況。采用適當分析軟件進行細胞 DNA含量分析和光散射分析?！咀⒁馐马棥?. 熒光染料均存在淬滅問題，保存和使用過程中請盡量注意避光以減緩熒光淬滅。2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。3. 僅用于實驗室研究，不適合農(nóng)業(yè)/家庭/臨床用途使用。

【保存條件】-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光保存，有效期1個月【概述】細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色 (Propidium staining，即PI staining)方法進行細胞周期與細胞凋亡分析的檢測試劑盒。碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB）的類似物，能夠嵌入堿基對之間實現(xiàn)與雙鏈DNA結(jié)合。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強度和雙鏈 DNA的含量成正比。細胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定，然后根據(jù)DNA含量的分布 情況，可以進行細胞周期和細胞凋亡分析。 碘化丙啶染色后，假設G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。凋亡細胞由于細胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導致部分基因組DNA片段在染色過程中丟失，因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染，即熒光強度小于1，在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰，即凋亡細胞峰。 ?細胞發(fā)生凋亡時，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細胞凋亡的早期，細胞對前向角光散射的能力顯著降低，對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號均降低。因此可通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化觀察細胞凋亡情況。 ?本試劑盒通常應用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測。如果用于組織的細胞周期與細胞凋亡檢測，則必須把組織消化成單細胞狀態(tài)，才可以進行檢測，每個樣品的細胞數(shù)量可以為10-100萬?！臼褂梅椒ǎ▋H供參考）】1. 細胞樣品的準備：a. 對于貼壁細胞：小心收集細胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用胰酶消化細胞，至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時， 加入前面收集的細胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。 b. 對于懸浮細胞：1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預冷的PBS，重懸細胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊 離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。2. 細胞固定：加入1毫升冰浴預冷70%乙醇中，輕輕吹打混勻，4oC固定30分鐘或更長時間。通常固定2小時或以上更能保證染色效果，固定12-24小時可能效果更佳。1000g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的70%乙醇，以避免吸走細胞。加入約1毫升冰浴預冷的 PBS，重懸細胞。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的PBS，以避免吸走細胞。輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞，避免細胞成團。3. 碘化丙啶染色混合液的配制：參考下表，根據(jù)待檢測樣品的數(shù)量配制適量的碘化丙啶染色液： 1個樣品6個樣品12個樣品染色緩沖液0.5ml3ml6mlPI染色液（20×）25μl150μl300μlRNase溶液（50×）10μl60μl120μl總體積0.535ml3.21ml6.42ml4. 染色：每管細胞樣品中加入0.5毫升碘化丙啶染色混合液，緩慢并充分重懸細胞沉淀，37oC避光溫浴30分鐘。隨后可以4oC或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小時內(nèi)完成流式檢測，最好能在當日完成流式檢測。5. 流式檢測和分析：用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光，同時檢測光散射情況。采用適當分析軟件進行細胞 DNA含量分析和光散射分析?！咀⒁馐马棥?. 熒光染料均存在淬滅問題，保存和使用過程中請盡量注意避光以減緩熒光淬滅。2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。3. 僅用于實驗室研究，不適合農(nóng)業(yè)/家庭/臨床用途使用。